猪病

猪痢疾短螺旋体的症状及诊断要点

2016/12/22 来源:互联网 阅读:80847次

猪痢疾短螺旋体的病原特点有什么?


猪痢疾短螺旋体有4~6个弯曲,菌体长 6 -9μm,直径 0.3 — 0.5μm,多为2—4个弯曲,两端尖锐,形似双燕翅状。


用琼扩试验可区分猪痢疾短螺旋体的血清型,目前共有A-I 9个血清型。


猪肠道螺旋体的主要分为五类,包括猪痢疾短螺旋体、大肠多毛螺旋体、无害螺旋体、中间螺旋体和莫多奇螺旋体,其中猪痢疾短螺旋体是引起猪痢疾的主要病原,而多毛螺旋体则引起猪结肠炎,其他几种不引起致病,呈现弱溶血感染,引起猪的消瘦,往往呈混合感染趋势。


严格厌氧,生长缓慢(37℃生长5 — 7天),营养苛刻,通常需要10%的胎牛血清或者新鲜血液才能生长,在血平板上可见强β溶血呈云雾状,而无可见菌落,基础培养基中选择性地加入壮观霉素、多粘菌素B、万古霉素和利福平,可**本菌从肠道样品中的分离率


猪痢疾短螺旋体能在各个时期通过粪便排出,传播发生在易感猪,猪痢疾短螺旋体在潮湿的粪便中具有相当强的抵抗力。


它在0~10℃温度下,在用水稀释的粪便中能存活48d,在25℃下存活7d,在37℃下存活不超过24h,在另一项研究中,猪痢疾短螺旋体能在10℃温度下泥土中存活10d,在含有10%。


猪粪的土壤中存活78d,在纯猪粪中存活112d,对痢疾性粪便进行干燥处理能**消除猪痢疾短螺旋体,酚和次氯酸钠是最**的消毒剂。


有报道称接种大鼠仅为几天,**感染。动物感染模型可知,与小鼠的粪便接触后,发生感染的时间在十一天。鸟类也会传播该病,在英国的一个农场中,发现频繁接触猪群的海鹤体内发现了 SD病原,从某种意义上说,对于猪场存在鸟类来说也是一种风险因素。该病在家禽中传播的报道较少


猪痢疾短螺旋体病的临床症状


本病的潜伏期一般为7-8日,长的可达2-3个月


最急性型:见于流行初期,死亡率高。表现为剧烈下痢、水泻,内有粘液和带有血液或血块,粪便中混有脱落的肠道點膜或纤维素渗出物碎片,恶臭,俗称“黑粪”。因高度脱水状态,全身寒颤,抽搐死亡,病程12-24**


急性型:多见于流行的中后期,病猪排软便或稀便,粪便中含有黏液,多数粪便中含有血液或血凝块和脱落點膜组织碎片。迅速消瘦,多数转为慢性,病程7—10日


亚急性和慢性型:多见于流行的后期,亚急性病程为2—3周,慢性为4周以上。下痢反复发生,粪便含有黑红色血液和黏液。病猪食欲正常,进行性消瘦、贫血,生长迟滞,呈恶病质状态。


猪痢疾短螺旋体病诊断


痢疾短螺旋体的分离鉴定

1、涂片镜检


新鲜采集的血粪样本、大肠粘膜、大肠内容物等可以直接进行抹片,可以观察到许多弯曲呈双燕翅状的菌体,并可以观察到其运动性,或者使用革兰氏染色,在高倍油镜下观察,可以清晰的观看到革兰氏阴性的大量菌体。


螺旋体细胞是厌氧的,从Stanton的研究了解到猪痢疾螺旋体B204株可以持续在空气中暴露两个**以上,尽管如此,从外面取回来的样本也不能长时间暴露在空气中,运输时需要加上冰块以利于保存活力。


2、B.hyo的分离培养


取新鲜病料,在含有选择性加入的壮观霉素、多粘菌素B、万古霉素和的TSB或BHI鲜血平板上划线,在37°C、一个大气压含80%-95%N2和5%~20%的C02的厌氧培养箱中培养5-7天,挑取出现**云雾状溶血的区域,连续划线培养3代,**进行镜检或其它检测


3、PCR


Eider等根据PRE03CG中2.3 Kb DNA片段的序列分析,设计并合成了一个可PCR扩增为1. 55 Kb片段的寡核苷酸引物和内部寡核苷酸酸,探针特异性的能从9种血清型的B.hyo基因组中扩增出1.55 Kb产物。其敏感性可以达到1~10个猪痢疾短螺旋体/0.1g粪便样品。比选择培养基常规培养的敏感性高103倍


La等建立一套公认的PCR的检测体系,来鉴定粪便样品、大肠组织样本或直肠拭子中存在的B.hyo。根据 B.hyo 设计―对特异性引物,扩增出354bp大小的片段,此PCR检测的灵敏度可以达到103 ~104个/g粪便样品。


4、微量凝集试验


Joens和Forsgren等报道用含1 %胎牛(兔)血清PBS,0.05 mL分别滴入微量滴定板,将10倍稀释灭能的待检血清50μL加入第1孔,并倍比稀释至5孔,第6孔为抗原对照。每孔加菌体抗原50μL,经振荡后置37℃ 16-18**,然后室温静置1-2**观测结果,平均滴度为1: 40以上的**认为该猪群感染猪痢疾短螺旋体。


5、间接ELISA检测


B.hyo血清学诊断存在的主要问题是抗原性普遍较弱,特异性与敏感性较低。


罗满林等用超声破碎悬液做为包被抗原进行酶联免疫吸附试验,测定了感染猪血清中的抗B.hyo抗体

La等采用基因工程的方法原核表达蛋白BmpB的外膜脂蛋白,30kD作为包被抗原的间接ELISA检测技术,可以特异性的识别B.hyo自然感染的猪群,推测以BmpB为包被抗原可能具有临床应用价值。


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