伪狂犬病是当今危害全球养业最严重的病, 给养业造成了巨大的经济损失。西方发达国家大多在90年代相继制定和启动了该病的根除计划, 并取得了**的成效。该病在我国广泛存在并严重发病, 损失巨大。“ 九五”期间我们承担了国家科技部中国生物工程开发中心生物技术攻关项目“ 伪狂犬病基因缺失疫研制”课题。经过五年的辛勤劳动, 利用本室从我国华中地区发病病料分离鉴定筛选到抗原性和免疫原性强、在细胞上增殖滴度高的伪狂犬病毒鄂A株为亲本材料, 成功研制出伪狂犬病毒gG和gE两株单基因缺失灭活用于种免疫, TK/gG和TK/gE两株双基因缺失弱毒用于仔和育肥的免疫。相比较而言, gG和TK/gG的免疫原性和免疫效果要略高于gE和TK/gE。前者对当前我国伪狂犬病正处在高发病率时期使用更为合适。但考虑到我国马上要加人世贸组织(WTO), 因欧洲和美国部分地区大多使用的TK/gE基因缺失, 考虑到将来我国动物出口便于与国际接轨, 因而我们也研制了TK/gE基因缺失, 供用户在使用时选择。同时我们也研制成功区分强弱毒感染的鉴别诊断方法:gG-ELISA(酶联免疫吸附试验)和gE-ELISA,gG-LAT(乳胶凝集试验)和gE-LAT。经查新和专家鉴定,以上这些产品在国内都是**研制成功。而用基因工程表达产物建立的gG和gE乳胶凝集鉴别诊断方法在国际上也是**, **了国内外空白, 该方法具有操作简便, 便于基层和现场使用, 其敏感性高、特异性强, 是最理想的鉴别诊断方法。上述基因缺失经动物实验比较和临床大面积中试应用证明, 从产生抗体水平高、时间快和免疫效果等方面均优于国内外同类产品。尤其是TK/gG双基因缺失弱毒可经肌肉注射或滴鼻进行仔的超前免疫和发病仔的紧急预防注射, 可在24**内产生**的作用, 具有药到**的效果。鉴于上述基因缺失和鉴别诊断方法技术与产品均已成熟和针对我国伪狂犬病近年来的实际情况, 特提出我国伪狂犬病的根除计划,并希望首先能在规模化养场试行和实施。
1 伪狂犬病根除计划方案
根据不同的场、不同情况和实验室检测情况,选择不同的方案与措施。
伪狂犬病毒是属于高度潜伏感染的病毒, 而且这种潜伏感染随时都有可能被体内外和环境变化的应激因素刺激而引起疾病爆发, 同时基因缺失弱毒注射带有野毒潜伏感染的动物时, 由于活病毒之间发生基因交换和重组的可能性, 加上种饲养的时间长(3-4)年, 因此这种可能性和机率就会增大, 而且国内外都有因注射弱毒而引起伪狂犬病爆发的例子。因此在西方发达国家如德国严格规定种只允许使用灭活。美国在其伪狂犬病的根除计划中, 也规定种只允许使用灭活。根据以上这些特点, 因此我们建议在我国种也只能使用基因缺失灭活。我们专门研制了针对种用的单基因缺失浓缩灭活。尤其是单gG基因缺失灭活对病毒的免疫原性几乎完全没有什么影响。因为gG是病毒的非结构蛋白基因, gG蛋白是病毒繁殖时分泌到细胞培养的上清中与病毒免疫原性无关该基因缺失后, 对病毒的免疫原性没有什么影响, 但又可以作为鉴别诊断。
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