牛结核病疫苗有哪些？怎么打？

当前对牛结核病的防疫还没有**的疫苗，主要是采取检疫、扑杀处理阳性牛、净化牛群和建立健康牛群的方法。因为牛结核皮内注射实验有费时间、费人力、器械落后等很多缺陷，不适合大群检疫，需要改进这种检疫方法。本病缺乏良好的疫苗，曾用卡介苗和鼠型结核菌种预防本病，虽都能产生一定的免疫力，但都欠理想。

牛结核病疫苗有哪些?

1、卡介苗

卡介苗(BCG)自1921年发明以来，至今仍是预防结核病的**商业疫苗。但是BCG的免疫保护力却并不令人满意。牛免疫BCG后，不能提供明确保护，当牛分枝菌强毒株感染后虽然不至于给机体造成损害，但细菌经常停留在侵入部位附近的淋巴结中，导致局部结节形成。并且牛如果感染环境中分枝杆菌而致敏后，BCG免疫效果会减弱。另外接种BCG后，用结核菌素试验无法将疫苗接种牛与自然感染牛区分开来。所以，世界各国都在致力于改进BCG苗或其免疫方式，研制其他新型**的结核病疫苗。

BCG的免疫年龄、免疫途径的优化或其他减毒分枝菌活疫苗的研制。用BCG免疫新生牛能诱导比5~6月龄牛更高水平的免疫应答，从新生牛对牛结核菌素试验的γ干扰素反应维持时间更长可以看出，BCG活菌在新生牛体内能持续存在更长时间。另外，BCG接种比环境中其他分枝杆菌感染早，从而不受这些菌干扰也是一个原因。其在6星期后重新接种BCG反而**了保护水平，因为此时激发了不恰当的免疫反应。因此用BCG免疫新生牛，是牛结核病预防中引入的一个新观念。对于BCG干扰结核菌素试验的问题，人口服BCG可抑制针对结核菌素试验的迟发性超敏反应，由此推测牛经口免疫BCG出现结核菌素皮试阳性反应的机会也较低。另外由于牛分枝杆菌自然情况下是通过黏膜感染，所以经口免疫还能增强BCG的免疫效果。

除BCG以外，最近几年只有为数不多的减毒分枝菌活疫苗在进行牛体试验。在牛已被环境中分枝菌预先致敏的情况下，两株减毒的牛分枝菌能诱导针对牛结核的保护，而此时BCG**。说明使用其他分枝菌活疫苗具有一定潜力。

2、新型疫苗

蛋白质亚单位苗的分枝杆菌含有一个或多个分蛋白组分。结核蛋白亚单位疫苗主要有培养滤液蛋白(CFP)混合物疫苗、单一蛋白亚单位疫苗、复合蛋白亚单位疫苗、嵌合蛋白亚单位疫苗以及表位亚单位疫苗。用蛋白疫苗免疫，已证明很难诱导牛结核的保护性免疫。在一些情况下，免疫分枝菌蛋白疫苗因诱导不恰当的免疫反应，反而增加了疾病的传播。许多佐剂在小动物模型能诱导产生强烈的抗体反应，但是针对牛分枝菌抗原的γ干扰素反应很弱，因而没有保护力。可见蛋白亚单位疫苗难以诱导足够强的细胞免疫。

DNA疫苗相比活疫苗和蛋白质亚单位疫苗具有以下优点：易于制备，生产成本低，便于推广;稳定、**;不干扰结核菌素皮试诊断;具有治疗作用;其免疫保护力不受环境中分枝杆菌的干扰。将分别编码MPB70、MPB83和Ag85A(antigen 85A)的3种DNA疫苗进行牛体免疫试验，其中编码MPB83的DNA疫苗能够诱导牛产生针对牛分支杆菌的细胞免疫和体液免疫，而编码MPB70的DNA疫苗诱导的免疫反应则相对较弱，编码Ag85A的DNA疫苗则几乎不能诱导产生免疫反应。这3种DNA疫苗免疫的牛都不能对结核菌素试验产生反应。在随后的攻毒试验中他们均不能抵御牛分歧杆菌强毒株的攻击。其他如编码Hsp65、Hsp70和Apa的DNA疫苗在牛体试验均证明**。

用分枝杆菌蛋白疫苗和BCG在毗邻位点皮下免疫也获得了满意的结果。添加佐剂的牛分枝杆菌培养浸出蛋白苗和BCG的联合免疫组与未免疫组相比，细胞免疫反应强度差异**，涉及病理学和微生物学的6个疾病参数**下降。作为对照，BCG单独免疫组只有一个参数**下降。

用BCG联合免疫重组腺病毒效果也很理想。牛BCG/rAd85A免疫组牛用BCG初次免疫，表达分枝杆菌抗原Ag85A的腺病毒加强免疫。rAd85A/BCG免疫组、rAd85A/rAd85免疫组中，rAd85A/BCG诱导最强的IFN-γ反应，培养物免疫斑点试验显示均能诱导回忆反应，以BCG/rAd85A和rAd85A/BCG最强。

目前选定人结核的三个候选疫苗在牛体对牛结核诱导具有**的保护作用。他们分别是蛋白疫苗Mtb 72F，表达Ag85的复制缺陷的痘苗病毒疫苗(Ankara株，r-MVA-Ag85)，表达Ag85的重组BCG(r-BCG-Ag85)。用r-MVA-Ag85和BCG联合，与用r-MVA-Ag85和表达Ag85的禽痘病毒联合免疫或单独BCG免疫相比，前者Ag85特异性的γ干扰素分泌细胞数量增加更为**。

用于牛体试验的牛结核病候选疫苗主要包括BCG、其他减毒活疫苗、DNA疫苗、蛋白疫苗等，这些候选疫苗共同的缺点是免疫保护力低下。随着对牛分枝杆菌的致病机制和机体的免疫应答的深入研究以及后基因组学的进步，可望为研制牛结核病新型**疫苗提供理论指导。

牛结核病疫苗怎么打?

对受威胁的犊牛可进行卡介苗接种，一般在出生后30天时，在牛胸垂皮下注射50～100ml，以后每年要接种一次。

牛结核病疫苗免疫存在哪些缺陷？

1 皮内注射试验及缺陷

(1)皮内注射试验。编号登记被检牛，于颈侧中部上1/3处剪毛，用卡尺测量皮皱厚度，做好记录。经消毒后皮内注射结核菌素0.1mL。

(2)观察反应。皮内注射结核菌素后72**，仔细观察注射部位的红肿热痛反应，同时用卡尺测量皮皱，详细记录编号及观察结果。如果出现疑似反应，应于24**、48**之后分别测量皮皱厚度和观察炎性反应2次，且做好记录。

(3)判定标准。将局部有**的炎性反应，皮皱厚差大于或等于4.0mm者判定为阳性，记为(+)。将局部炎性反应不**，皮皱厚差大于或等于2.0mm、小于4.0mm者判为疑似反应,记为(+-)。对出现疑似反应的牛间隔2个月进行第二次检疫，出现疑似反应或阳性反应者，则判为阳性。将没有炎性反应，皮皱厚差小于2.0mm者判为阴性。对出现阳性反应的牛必须予以扑杀。

2 皮内注射法的缺陷

(1)影响实验的准确性。牛体大、力气大，皮肤特别敏感，保定费力费时，尤其是第二次注射或观察时不好保定。保定不好则影响注射量和测量的准确性。

(2)注射器和卡尺落后。牛结核检疫，现用0.1mL的蓝心塑料注射器，7#针头。牛皮坚韧，尤其是瘦牛的皮肤较硬，不好扎入，也不好注液。目前检疫使用的卡尺是工业用的卡尺，特别笨重，测量之后需要固定，但是固定螺子容易丢失，尺子一动，测量即告失败。且测量时人为干扰因素较多，比如**次测量和第二次测量，必须是同一个人，用同一强度的力气推挤牛皮。第二次测量时，推松了，容易出现假阳性，推紧了，容易出现假阴性。

(3)检疫时间过长。保定牛需要很长的时间，如果没有长廊式保定栏，就无法保定好一群牛。注射时间比较长，如果针头弯曲，针眼被堵住，就更费时间。瘦牛的皮肤较硬，皮屑又多，针头容易弯曲或者折断。针眼太细，进入血液或皮屑，也容易被堵塞。

3 改进措施

(1)改进器械。需要设计和制造出一种注射器和卡尺成一体的、用电力控制的连续注射器，还能显示推力强度、厚度和注射时间。需要挤压力固定，挤压达到一定压力之后从上侧自动注射结核菌素。每注射一头牛，需要针头自动换掉。并且注射器有控制伐，测量皮皱厚差时自动关掉，不注药液。改进当前使用的注射器和卡尺，是**工作效率，**检测结果的可靠性和正确性所必不可少的**办法。

(2)置换皮内注射和点眼法的使用顺序。当前对牛结核检疫惯用的是皮内注射法，少数地区先用皮内注射法，后用点眼法，将点眼法作为辅助实验法来使用。使用点眼法检疫，时间短、操作方便、人为干扰因素少、观察方便。保定被检牛时，一人用一手抓牛角(或抓耳朵)，用另一只手抬起牛嘴，将牛颈稍拧就露出眼结膜。使用浸有硼酸溶液的棉花擦净眼角后，用点眼器点入0.2～0.3mL结核菌素**。3**、6**、9**分别观察反应。3**后出现阳性的，不用继续观察)。将眼帘肿胀，结膜潮红，有脓性分泌物者判为阳性，将炎症轻微，有黏液性分泌物者判为疑似反应，将流泪或没有反应者判为阴性。对牛群先用点眼法进行群检，挑出极少数的阳性或疑似牛，再用皮内注射法进行个体检疫，判定无误，就可以**检疫时间，**工作效率。

(3)利用血清学反应。变态反应和血清学反应都是由病原体引起的免疫学反应。用皮内注射法做牛结核检疫是利用变态反应，结核菌素是诊断液。因为牛结核皮内注射实验有费时间、费人力、器械落后等很多缺陷，不适合大群检疫，需要改进这种检疫方法。本办法主要用于对慢性传染病或者急性传染病的慢性过程的检疫。血清学反应是体外免疫学反应，操作方便，灵敏度高、反应快、特异性高，能**检测的正确性。因为采血比起皮内注射所需时间短，对主试验的影响不大。需要研制一种新的诊断液，即牛结核杆菌试管凝集抗原，或者是牛结核杆菌平板凝集抗原，再或者是牛结核病沉淀血清，以满足牛结核病的群检需要。有了这种诊断液，就像检疫牛羊的布氏杆菌病一样，既方便又准确。